Т-лимфоциты, их антигеннезависимая и антигензависимая дифференцировка

Т-лимфоциты, их антигеннезависимая и антигензависимая дифференцировка

Т-лимфоциты — тимусозависимые клетки, 70-90% от всех лимфоцитов. В виде предшественников и бластов они мигрируют из красного костного мозга в вилочковую железу, попадая в корковую зону ее дольки. Проходят антигеннезависимую дифференцировку (генетически программируются на образование клеток, способных давать специфический тип иммунного ответа) и специализируются в двух направлениях. Одни бласты (большая часть) превращаются под влиянием тимозина, тимулина и тимопоэтина В популяцию Т-лимфоцитов, реагирующих на антиген. Химические гуморальные факторы обеспечивают дозревание Т-лимфоцитов вне вилочковой железы в периферических лимфатических органах (лимфатический узел, селезенка, лимфоидные фолликулы других органов), заселяя тимусозави-симые зоны (антигензависимая дифференцировка). Другая часть бластов дифференцируется с образованием клеток, несущих рецепторы к антигенам собственного организма (аутоиммунный ответ).

В тимусозависимых зонах (лимфатические узлы пара кортикальная зона, селезенка — периартериальная) под влиянием антигенов и оседлых интердигитирующих макрофагов (короткоотростчатые) Т-лимфоциты превращаются в Т-эффекторные иммуноциты и Т-клетки памяти. Среди эффекторных клеток различают:

1. Цитотоксические Т-киллеры — разрушают (лизируют) чужеродные и свои видоизмененные клетки непосредственно или выделяя соответствующие цитокины. Среди них выделяют: НК — клетки (нулевые, натуральные), не имеющие поверхностных рецепторов и составляющие резерв недифференцированных иммуноцитов. При дифференцировке на поверхности Т-киллеров появляются специфические мембранные молекулы гликопротеидов (антигены), обнаруживаемые с помощью набора антител (кластеров дифференцировки). Создана CD-номенклатура:

Кластер CD1 — маркер ранней стадии созревания Т-клеток в вилочковой железе.

Кластеры CD2, CD3 — характерны для Т-лимфоцитов крови и периферических лимфоидных органов.

Кластеры CD4+ — являются Т-хелперами.

Кластеры CD8+ — являются Т-супрессорами.

Кластеры CD 16 — натуральные киллеры, образующие первую линию защиты, действуют немедленно.

2.Т-хелперы (помощники) распознают чужеродные антигены (представляемые макрофагами), усиливают пролиферацию, миграцию, дифференцировку В-лимфоцитов, образование из них плазмоцитов и продукцию иммуноглобулинов. Выделяя интерлейкины, усиливают подвижность и фагоцитарные свойства макрофагов, усиливают функцию Т-киллеров и размножение Т-клеток в вилочковой железе. По типу выделяемых цитокинов различают 2 типа Т-хелперов:

1) Продуцируют интерлейкин 1, интерлейкин 12, интерферон. Участвуют в гиперчувствительных реакциях замедленного действия

2) Секретируют интерлейкин 3, интерлейкин 4, 5, 6. Участвуют в гиперчувствительных реакциях немедленного типа.

3. Т-супрессоры — ингибируют активность Т-хелперов и плазмоцитов, контролируя количество последних и количество антител, синтезируемых этими клетками, а также подавляют взаимодействие между Т- и В-лимфоцитами. Морфологически все Т-лимфоциты имеют вид округлых клеток с округлым ядром, сравнительно небольшой ободок цитоплазмы. Величина 5-13 мкм, ядро 3-12 мкм. По величине различают малые, средние и большие. Большинство лимфоцитов относится к малым зрелым формам, ядро которых занимает почти весь объем цитоплазмы, содержит одно или несколько ядрышек. В цитоплазме лежат несколько митохондрий, слабо развиты эндоплазматическая сеть и комплекс Голь-джи, много лизосом. На поверхности — множество пальцевидных выростов, снабжены соответствующими рецепторами на плазматической мембране, в связи с этим способны прилипать к эритроцитам барана, образовывая «розетки». Этот иммунологический метод используется для их идентификации (отличие от В-лимфоцитов). Долгоживущие.

4.Т-клетки памяти — образуют быстрый рециркуляционный пул, который постоянно «работает» в организме. Они «запоминают» качество антигена и при повторной встрече с ним формируют ускоренную «вторичную» иммунную реакцию. Приобретенное свойство памяти лимфоцитов наследуется. Живут 20 и более лет.

Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.104 сек.)

АНТИГЕННЕЗАВИСИМАЯ И АНТИГЕНЗАВИСИМАЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВКА В- И Т-ЛИМФОЦИТОВ

Во всех клетках тела животного, включая стволовую кроветворную, кроме начавших дифференцировку В- и Т-лимфоцитов, гены иммуногло­булинов и Т-клеточных рецепторов на­всегда остаются в «разорванном» со­стоянии, в виде сегментов, разделен­ных интронами. И только в В- и Т-лим- фоцитах на самых ранних этапах их специальной дифференцировки начи­нается процесс объединения сегментов ДНК, предназначенных для кодирова­ния разных частей молекул иммуно­глобулинов и рецепторов Т-клеток— V- и С-фрагментов.

Возникает вопрос: какие из выше­описанных процессов перестройки ге­нов происходят при антигеннезависи- мой (в центральных органах иммунной системы) и антигензависимой (в пери­ферических лимфоидных органах) диф- ференцировках В- и Т-лимфоцитов?

В центральных лимфоидных орга­нах (костном мозге млекопитающих и в бурсе Фабрициуса у птиц) происхо­дит антигеннезависимая дифференци­ровка В-лимфоцитов (первая пере­стройка генов), при которой последо­вательно присоединяются друг к другу Уь и у,-сегменты, образующие У-об- ласть Ь-гена, а также Ун-, О- и ^-сег­менты, образующие У-область Н-гена.

В периферических лимфоидных орга­нах при участии только антигена проис­ходит активация тимуснезависимого клона виргильных В-лимфоцитов, а для активации большинства клонов вир-

гильных В-лимфоцитов (тимусзави- симых) необходимо участие антигена и некоторых факторов Т-хелперов (рис. 41). Антигенный (специфический) сигнал, распознаваемый рецепторами (1§М и 1^0) В-клеток, определяет вы­бор клона виргильных (иммунокомпе- тентных) В-лимфоцитов для заверше­ния их дифференцировки, а хелперные (неспецифические) сигналы стимули­руют пролиферацию активированных В-лимфоцитов и превращение их в плазматические клетки, продуцирую­щие антитела определенной специфич­ности.

Читайте также:  Ложный круп причины, симптомы, диагностика, лечение, профилактика

Плазматические клетки не имеют рецепторов к антигену (они сбрасы­ваются в процессе дифференцировки В-лимфоцитов) и способны (при пер­вичном иммунном ответе) к синтезу прежде всего секреторных молекул 1§М (пентамеров). Часть активированных антигеном В-лимфоцитов превращает­ся не в плазматические клетки, а в клет­ки памяти, в ДНК которых Ун-области присоединяются к Сн-областям генов одного из других классов антител (1§С, 1§А, 1§Е). Это создает условия для син­теза иммуноглобулинов соответствую­щих классов, которые наряду с 1§М (мономером) встраиваются в мембра­ну клеток памяти. Следовательно, в В-клетках памяти роль мембранных ре­цепторов принадлежит антителам клас­са 1§М (мономеру), экспрессирован­ным на поверхности всех иммуноком- петентных В-лимфоцитов, и антителам одного из других классов.

При вторичном ответе В-клетки па­мяти распознают антиген; в результате взаимодействия с ним активируются, приобретают способность к пролифера­ции и завершению дифференцировки в плазматические клетки, лишенные спе­цифических рецепторов к антигену, но способные к синтезу и секреции соот­ветственно молекул 1^0, 1§А, 1§Е, кото­рые являются антителами преимуще­ственно вторичного ответа.

Т-лимфоциты образуются в тимусе из недифференцированных предше­ственников, имеющих гены, кодирую­щие а- и (3-цепи Т-рецепторов (ТСК). Эти гены, аналогичные генам антител, содержат отдельные, «разорванные» на сегменты гены (мини-гены); V-, О-, и С-сегменты, которые объединяются в процессе развития Т-клеток в тимусе. Гены а- и (3-цепей (а также у и 5-цепей) ТСК претерпевают рекомбинацию ДНК при участии тех же рекомбиназ, которые действуют при дифференци­ровке В-лимфоцитов. Но в Т-лимфоци- тах эти ферменты «не трогают» гены иммуноглобулинов, а в В-лимфоцитах «не трогают» гены ТСК.

Гены а-цепи имеют 70—80 У-сегмен- тов и 61 1-сегмент, гены (3-цепи— 52 У-сегмента, 2 О-сегмента и 13 ,1-сегмен- тов. Кроме того, гены а-цепи имеют 1 С-сегмент, а гены (3-цепи — 2 С-сегмен­та. Между У- и .1-сегментами цепи нахо­дится локус генов 5-цепи, состоящий из 3 О-сегментов, 3 Л-сегментов, 1С-сег- мента. У-сегменты (

4) «вкраплены» среди У-сегментов а-цепи.

В результате дифференцировки Т-лимфоцитов в тимусе создается анти- геннезависимое разнообразие Т-кле­точных рецепторов аналогично разно­образию антител за счет образования огромного количества клонов различ­ных моноспецифичных виргильных (иммунокомпетентных) Т-лимфоци- тов. Т-клеточные рецепторы на повер­хности клетки нековалентно связаны с одним и тем же набором мембранных белков — так называемым комплексом ТЗ (или СДЗ), который имеется на по­верхности всех зрелых Т-клеток. Воз­можно, этот комплекс участвует в пе­редаче сигнала от активированного ан­тигеном Т-клеточного рецептора внутрь клетки.

Механизм уничтожения клеток-ми­шеней Т-киллерами изучен недоста­точно. Некоторые клоны Т-киллеров стимулируют образование в клетках- мишенях трансмембранных каналов, повышающих проницаемость плазма­тической мембраны, что способствует гибели клетки.

У мышей и человека, у которых поверхностные рецепторы (маркеры) Т-лимфоцитов изучены в наибольшей степени, выявлены по крайней мере три субпопуляции виргильных Т-кле- ток: Т-хелперы («помощники»), Т-кил­леры («убийцы»), Т-супрессоры («инги­биторы»). Вопрос о том, на каком уров­не происходит расхождение путей диф­ференцировки этих субпопуляций, не решен однозначно, хотя имеются дан­ные о расхождении путей дифференци­ровки уже в тимусе.

Иммунокомпетентные Т-лимфоци- ты активируются при их взаимодей­ствии с фрагментами антигенов, ассо­циированными с гликопротеинами МНС на поверхности других клеток (антигенпредставляющих) собственно­го организма, главным образом макро­фагов. Макрофаги в периферических лимфоидных органах частично погло­щают и переваривают антиген, а часть антигена (с антигенной детерминантой) фиксируют на своей поверхности, представляя ее Т-лимфоцитам (Т-хел- перам и Т-киллерам) в комплексе с гли­копротеинами МНС.

Переработка антигена в макрофагах и экспрессия гликопротеинов МНС на клетках — процессы относительно неза­висимые и могут происходить в различ­ных клетках. Например, макрофаги мо­гут передавать фрагменты антигена (после их переработки) дендритным клеткам лимфоидных органов, которые экспрессируют на своей поверхности гликопротеины МНС и в комплексе с ними представляют антигенный фраг­мент Т-хелперам (или другим Т-клет- кам). Вопрос строгой необходимости переработки антигена перед его пред­ставлением Т-клеткам окончательно не решен. Имеются косвенные данные, что вспомогательные клетки способны представлять не только растворимый (фрагментарный), но и корпускуляр­ный антиген.

В периферической крови циркули­руют два морфологически различных типа Т-лимфоцитов: первый — относи­тельно мелкие клетки (малые лимфоци­ты), в типичном случае лишенные гра­нул, с высоким соотношением величи­ны ядра к величине цитоплазмы (Я : Ц), и второй — более крупные клетки с меньшим соотношением Я : Ц, содер­жащие в цитоплазме гранулы (большие гранулярные лимфоциты — БГЛ).

Большая часть покоящихся Т-клеток крови экспрессирует сф-Т-клеточные рецепторы (сф-Т-клетки) и может иметь один из двух морфологических типов. К малым лимфоцитам относят­ся 95 % хелперных клеток (Тх) и 50 % цитотоксических Т-лимфоцитов (Тц), к БГЛ — менее 5 % Тх (С04) и пример­но 50 % Тц (СБ8). Небольшая часть сф-Т-клеток не экспрессирует ни С04, ни С08-маркеры.

Читайте также:  Цереброваскулярная болезнь (недостаточность) симптомы, лечение, последствия и прогноз

Признаки БГЛ свойственны также естественным киллерным клеткам (ЕК) и субпопуляции Т-лимфоцитов с уб-ре- цепторами (у5-Т-клетки). Циркулирую­щие уб-Т-клетки лишены С08-маркера (уб-Т-клетки СП8 ). Они составляют минорную субпопуляцию Т-лимфоци­тов крови. Другая часть у5-Т-клеток (уб-Т-клетки СЕ)8+) является обычным компонентом слизистых оболочек. уб-Т-клетки С08+ обладают рецептора­ми, специфичными к определенным бактериям и вирусным антигенам и мо­гут играть важную роль в защите слизи­стых оболочек организма от инфекции.

Большинство В-клеток (зрелые, вир­гильные) периферической крови эксп­рессируют на своей поверхности имму­ноглобулины двух классов: 1§М и 1§0. На каждой клетке клона В-лимфоцитов одной специфичности антигенсвязыва- ющие центры и 1ёМ, и 1дО, выступаю­щие в качестве рецепторов для анти­гена, идентичны. На менее чем 10% В-клеток крови экспрессированы 1§С, 1§А, 1еЕ (на В-клетках памяти). В-кле­ток памяти с рецепторными молекула­ми 1§А на мембране много в слизистой оболочке кишечника. Плазматические клетки в норме встречаются преимуще­ственно во вторичных лимфоидных органах и тканях, и их довольно много в красном костном мозге. В кровотоке плазматические клетки составляют не более 0,1 % циркулирующих лимфоци­тов (А. Ройт и др., 2000).

Антигензависимая дифференцировка Т-лимфоцитов

Наивные Т-лимфоциты, образовавшиеся в тимусе, выходят в периферическую кровь и участвуют в рециркуляции, проходя через периферические лимфоидные органы, ткани и лимфатические сосуды. Фенотип этих клеток либо CD4 + , либо CD8 + . Лишь небольшая часть клеток (около 2%) может иметь фенотип CD4 + CD8 + – это незрелые клетки.

Циркулирующие наивные Т-клетки имеют продолжительность жизни от нескольких месяцев до нескольких лет, они постоянно замещаются за счет костномозговых предшественников, которые созревают в тимусе. Кроме того, они постоянно пролиферируют на низком уровне на периферии, замещая погибающие клетки. Этот уровень может повышаться при лимфопении, вызванной той или иной причиной. В возрасте около 60 лет у человека практически прекращается образование новых Т-лимфоцитов в тимусе (возрастная инволюция тимуса). Число циркулирующих наивных Т-лимфоцитов при этом сохраняется практически полностью за счет пролиферации существующего пула этих клеток. Такой механизм приводит к уменьшению репертуара различных по специфичности ТКР клонов Т-лимфоцитов, в том числе способных распознавать инфекцию. Это, однако, отчасти компенсируется за счет того, что с возрастом происходит накопление клеток памяти, специфичных к обычно встречающимся антигенам.

Выживаемость наивных Т-лимфоцитов зависит по крайней мере от двух обстоятельств: во-первых, – это периодическое связывание ТКР со слабой аффинностью с комплексом «антигенный пептид — белок МНС»; во-вторых, необходимо присутствие ИЛ-7, который в организме постоянно продуцируется многими типами клеток.

В периферических органах адаптивной иммунной системы происходит встреча наивных Т-лимфоцитов с антигенами и начинается их антигензависимая дифференцировка.

Антигензависимая дифференцировка Т-лимфоцитов включает четыре основных этапа:

· распознавание антигена функционально незрелыми (наивными) Т-лимфоцитами в кооперации с АПК, которые осуществляют процессинг и представление антигена;

· их ответная реакция на антиген в виде пролиферации и дифференцировки до зрелых эффекторных клеток;

· участие в собственно эффекторной фазе иммунного ответа – нейтрализации и уничтожении антигена;

· формирование Т-клеток памяти.

Каким бы путем антиген ни попал в организм, с током лимфы он перемещается в ближайшие к месту проникновения (регионарные) лимфоузлы, где происходит его поглощение макрофагами (МФ), дендритными клетками (ДК) или В-лимфоцитами с последующей внутриклеточной переработкой (процессингом) и представлением (презентацией) в комплексе с молекулами МНС I или II класса на поверхности АПК. Антигены, образовавшиеся или локализованные в тканях (например, в очаге вирусной инфекции, опухолевого роста и др.), поглощаются незрелыми дендритными клетками (ДК), которые распознают эти антигены с помощью рецепторов врожденного иммунитета (Толл-подобных рецепторов или NOD-рецепторов), активируются, созревают и мигрируют в регионарный лимфоузел, где представляют на своей поверхности для распознавания Т-лимфоцитам процессированный антиген в комплексе с белками МНС (иммуногенный комплекс).

Первая встреча наивных Т-лимфоцитов с антигеном как раз и происходит в периферических лимфоидных органах при контакте с АПК, на поверхности которых антигенные детерминанты (Т-клеточные эпитопы, представляющие собой короткие антигенные пептиды, образованные при внутриклеточном процессинге антигена в АПК) представлены в виде иммуногенного комплекса.

Связывание антигенраспознающего рецептора (ТКР) наивных Т-лимфоцитов с иммуногенным комплексом на поверхности АПК (с участием ТКР, молекул CD3, CD4 или CD8) обеспечивает этим клеткам лишь один, первый, специфический сигнал. Однако для пролиферации и дифференцировки в зрелые эффекторные Т-лимфоциты им необходим еще и второй, костимулирующий сигнал. Этот сигнал обеспечивается ИЛ-1 и другими цитокинами, а также взаимодействием корецептора В7 на поверхности АПК с соответствующим рецептором – белком CD28 – на поверхности наивных Т-лимфоцитов. Получение этих двух сигналов обеспечивает пролиферацию клона с последующей дифференцировкой. Если же клеткой получен только один, первый сигнал, а второй отсутствует, она вступает в апоптоз и погибает.

Читайте также:  Ибуклин детский Отзывы, инструкция по применению (как принимать), состав, аналоги, побочные действи

Примированные CD4 + и CD8 + Т-лимфоциты, получившие оба сигнала, начинают экспрессировать рецепторы к ИЛ-2 и синтезировать сам ИЛ-2, который, воздействуя на ИЛ-2-рецепторы этих клеток (в том числе и аутокринно), стимулирует размножение наивных Т-лимфоцитов, которое длится минимум 5 дней, с последующей дифференцировкой в зрелые эффекторные Т-лимфоциты.

Активированные наивные Т-лимфоциты, вступившие в пролиферацию, на 5-7 день достигают пика своей численности, при этом количество CD4 + Т-клеток возрастает примерно в 10 000 раз. Количество CD8 + Т-клеток, которые размножаются еще интенсивнее, при вирусной инфекции, например, может увеличиться в 50 000 раз. Такое быстрое размножение ведет к увеличению лимфоузлов, то есть, к развитию лимфоаденопатии.

Затем размножившиеся Т-клетки дифференцируются в зрелые эффекторные лимфоциты, обладающие необходимыми для уничтожения данного патогена функциональными свойствами (например, к образованию определенных субпопуляций CD4 + Т-лимфоцитов: Тх1, Тх2, Тх17 или CD8 + ЦТЛ).

Образовавшиеся в результате пролиферации и дифференцировки наивных Т-лимфоцитов зрелые эффекторные клетки мигрируют в патологические очаги (где находятся антигены, к которым они специфичны) и непосредственно осуществляют их нейтрализацию и уничтожение (CD8 + ЦТЛ) или индуцируют фагоцитарный тип иммунного ответа (Тх1). Часть эффекторных CD4 + Т-хелперов перемещается в лимфоидные фолликулы лимфоузла, где, контактируя с В-лимфоцитами, включают и регулируют синтез антител (часть Тх1 и Тх2, которые еще иногда называют фолликулярными Т-хелперами).

Процесс миграции вышедших из периферических лимфоидных органов эффекторных Т-лимфоцитов и их проникновение из крови в периферические ткани, где находится патологический очаг, контролируется целым набором молекул адгезии (адгезинов), среди которых различают семейства селектинов, адрессинов и интегринов. Адгезины экспрессируются как на Т-лимфоцитах, так и на эндотелии кровеносных сосудов периферических тканей. В результате взаимодействия соответствующих молекул адгезии Т-лимфоциты проникают в паренхиму органа.

Эффекторные Т-лимфоциты могут уже самостоятельно распознавать антиген и оказывать на него прямое действие и в отсутствие дополнительных костимулирующих сигналов.

Для того, чтобы пролиферация реагирующего на антиген клона не была чрезмерной, она тормозится, а затем останавливается за счет индукции экспрессии ингибиторного рецептора CTLA-4 на поверхности Т-лимфоцитов. Этот рецептор содержится в цитоплазме Т-клеток и быстро перемещается на их поверхность через 24 часа после их активации через ТКР. CTLA-4, подобно CD28, также связывается с В7, но с гораздо большей аффинностью, чем CD28. Связывание В7/CTLA-4 прерывает активационный сигнал и тормозит пролиферацию клона.

У животных, лишенных гена CTLA-4, развивается обширная лимфопролиферация, сопровождающаяся аутоиммунными поражениями и приводящая к гибели животных вскоре после рождения.

Несколько позднее, чем экспрессия CTLA-4, начинается экспрессия на Т-клетках еще одного ингибиторного рецептора – PD-1 (рецептора для индукции апоптоза – программируемой смерти). Через этот рецептор при взаимодействии его с лигандом PD-1L (который постоянно экспрессируется на низком уровне на многих типах клеток в различных тканях) ингибируется передача активирующих сигналов от ТКР и В7/CD28, и тем самым тормозится и останавливается Т-клеточный ответ.

В конечной стадии адаптивного иммунного ответа численность клона, осуществляющего ответ на данный антиген, снижается, оставляя определенное количество антигенспецифических Т-клеток памяти.

Эти клетки имеют хорошо развитый рецепторный аппарат, экспрессируют в том числе рецепторы к цитокинам и адгезины, поэтому Т-клетки памяти способны быстро реагировать непосредственно на антиген при его повторном попадании в организм. Большинство Т-клеток памяти относятся к хелперной субпопуляции, то есть имеют фенотип CD4 + . Они рестриктированы по белкам МНС II класса.

Продолжительность жизни клеток памяти варьирует от нескольких месяцев до нескольких десятков лет. Их выживаемость поддерживается за счет ИЛ-7. Для поддержания выживаемости CD8 + ЦТЛ памяти необходимы ИЛ-7 и ИЛ-15. CD8 + Т-клетки памяти являются более долгоживущими, чем CD4 + Т-клетки памяти. Например, CD8 + Т-клетки памяти, образующиеся при вакцинации против кори, могут иметь продолжительность свыше 30 лет. Продолжительность жизни клеток памяти к определенным антигенам генетически детерминирована как для вида в целом, так и для отдельных индивидуумов.

Т-клетки памяти, в частности, обеспечивают иммунитет – невосприимчивость организма к инфекции при повторном попадании инфекционных агентов в организм.

Формирование Т-клеток памяти лежит в основе механизма вакцинации против большинства вирусных инфекций.

Различают 2 типа Т-клеток памяти: центральные и эффекторные. Центральные Т-клетки памяти при повторном поступлении антигена в организм, распознав его, пролиферируют, чтобы сформировать пул новых эффекторных Т-лимфоцитов. Поэтому вторичный ответ на антиген с участием этих клеток развивается не раньше, чем на 3-4 день.

Эффекторные Т-клетки памяти после повторного контакта с антигеном способны к немедленной активации и поэтому осуществляют ответ на антиген практически сразу после его повторного попадания в организм.

Дата добавления: 2015-01-18 ; просмотров: 790 ; Нарушение авторских прав

Ссылка на основную публикацию
Тимол Инструкция по применению лекарств, аналоги, отзывы
Порошок Тимол-В против заразных заболеваний пчел Препарат выпускает российское предприятие УНИФАРМ. Активный компонент — тимол. Терапевтическая форма— порошок для орального...
Тест на беременность — моча и сода, правда это или нет
/ Как определить беременность с помощью йода фото.md Как определить беременность с помощью йода фото Любое использование материалов сайта возможно...
Тест на беременность Clearblue инструкция по применению многоразового электронного устройства для ст
Тест на беременность Clearblue Тест на беременность Clearblue – это современный прибор, который с высокой точностью позволяет определить, произошло зачатие...
Тиннитус (шумы в ушах) Centro Coromina — Dr
Тиннитус. Как избавиться от звона в ушах Тиннитус с полным правом можно назвать социальной болезнью. Хотя фактически это симптом (такой,...
Adblock detector